Occurrence of antibodies against Leptospira spp. in free-ranging wild canids from the Brazilian savanna / Ocorrência de anticorpos contra Leptospira spp. em canídeos selvagens de vida livre do cerrado brasileiro

The Brazilian savanna, also known as Cerrado, is one of the world's richest and most ecologically invaluable tropical savanna regions. There are few studies in Brazil about the diseases that affect the wild canids of this biome, which may be harmful to wildlife populations and public health. The aim of this study was to evaluate the occurrence of antibodies against Leptospira spp. in three Cerrado wild canids species using the microscopic agglutination test (MAT). Serum samples were tested from 19 crab-eating foxes (Cerdocyon thous), 14 maned wolves (Chrysocyon brachyurus), and seven hoary foxes (Lycalopex vetulus), all free-ranging animals found in the municipalities of Araguari and Uberlândia, Minas Gerais State, and Cumari, Goiás State, Brazil. Fourteen (35%) of these samples were seropositive. The most frequent serovars detected in the samples were Copenhageni and Hardjo, but reactions to the serovars Autumnalis, Grippotyphosa, Hebdomadis, Wolffi, and Icterohaemorrhagiae also occurred. Notwithstanding other reported results, this study is the first to report the presence of antibodies against Leptospira spp. in L. vetulus. The three species of wild canids examined may act as potential hosts for several serovars of leptospira in Brazil's savanna environment...

O cerrado é a mais diversificada savana tropical do mundo e constitui grande importância ecológica. Ainda assim, são poucos os estudos realizados no Brasil a respeito das doenças que acometem os canídeos desse bioma, o que causa prejuízos à população de animais selvagens e à saúde pública. Essa pesquisa foi realizada com o objetivo de avaliar a ocorrência de anticorpos contra Leptospira spp. em três espécies de canídeos selvagens do cerrado brasileiro utilizando o teste de soroaglutinação microscópica (SAM). Foram testadas amostras de soro sanguíneo de 19 cachorros-do-mato (Cerdocyon thous), 14 lobos guarás (Chrysocyon brachyurus) e sete raposas-do-campo (Lycalopex vetulus) de vida livre das regiões de cerrado de Araguari e Uberlândia, MG, e Cumari, GO. Dessas 40 amostras, 14 (35%) foram soropositivas. Os sorovares detectados com maior frequência foram Copenhageni e Hardjo, porém evidenciou-se também reação aos sorovares Autumnalis, Grippotyphosa, Hbedomadis, Wolffi e Icterohaemorrhagiae. Esse trabalho foi o primeiro a relatar a presença de anticorpos anti-Leptospira spp. em L. vetulus e verificou-se que as três espécies de canídeos utilizadas nessa pesquisa podem atuar como possíveis hospedeiros de diversos sorovares de leptospiras no ambiente de cerrado...

Produção e purificação de imunoglobulinas Y policlonais anti-Leptospira spp / Production and purification of polyclonal anti-Leptospira immunoglobulin Y

Objetivou-se verificar se galinhas imunizadas com uma solução de Leptospira interrogans inativadas e proteínas de membrana externa do sorovar Hardjo, poderiam produzir anticorpos policlonais específicos anti-leptospiras, detectáveis em testes ELISA. Foram imunizados oito galinhas com 25 semanas de idade, da raça White Leghorn, sendo três imunizadas com uma suspensão de leptospiras inativadas, três com uma solução de proteínas de membrana externa extraída do sorovar Hardjo e duas controle. Coletas de sangue foram realizadas quinzenalmente e de ovos diariamente. A IgY foi purificada a partir da gema dos ovos utilizando para a delipidação o método de diluição em água ácida e a precipitação com sulfato de amônio. Nos testes ELISA realizados para verificar a especificidade da IgY, foi demonstrada a produção de anticorpos anti-Leptospira, tanto no soro quanto nas gemas purificadas. O pico de produção de anticorpos específicos ocorreu na 5º semana após a primeira imunização. Ficou demonstrada a possibilidade da indução da produção de anticorpos específicos em galinhas imunizadas com leptospiras do sorovar Hardjo inativadas, bem como, com proteínas de membrana externa (PME) extraidas desse sorovar. As galinhas imunizadas com uma suspensão de leptospiras inativadas ou com PME de Leptospira interrogans do sorovar Hardjo produziram anticorpos reativos a PME Hardjo detectáves por teste ELISA.

The aim was to determine whether hens immunized with an inactivated suspension of Leptospira and a solution of outer membrane proteins extracted from the serovar Hardjo, could produce specific polyclonal antibodies to Leptospira, detected in ELISA assay. Eight hens White Leghorn race with 25-weeks-old were immunized, three with an inactivated suspension of Leptospira, three with a solution of outer membrane proteins (OMP) extracted from the serovar Hardjo and two controls immunized with saline. Blood samples were collected fortnightly and eggs daily. The IgY was purified from the egg yolk using the method for the delipidation of dilution with water acidic and ammonium sulfate precipitation. The ELISA assay was performed to verify the specificity of the IgY, these was possible to observe the production of specific antibody to Leptospira both in serum and purified egg yolk. The specific antibody titers peaked in the fifth week post immunization. The production of polyclonal IgY was effective for producing high titers of specific antibodies.

Seroprevalence and risk factors of antibodies against Leptospira spp. in ovines from Uberlândia municipality, Minas Gerais state, Brazil

The objectives of the present study were to verify the seroprevalence of anti-Leptospira spp. antibodies, identify the most frequent serovars and the risk factors associated with the infection in Uberlândia, Minas Gerais, Brazil . A total of 334 ovines blood samples were collected in 12 farms from Uberlândia municipality to be evaluated by means the Microscopic Agglutination Test (MAT) against 22 serovars of Leptospira spp. and an epidemiologic questionnaire was applied for each farm in order to correlate with risk factors of leptospirosis: sex, age and breed as well as contact with cattle, contact with dogs and presence of rodents. The prevalence of seropositive to MAT was found in seventy four ovines (22.2 percent; CI 95 percent 17.6-26.4 percent), with titers ranging from 100 to 3200. The most frequent serovars identified were: Hardjo, Autumnalis, Hardjo and Wolffi association and Grippotyphosa. Statistically significant differences were found in males, pure breeds and presence of rodents (p<0.05). The prevalence of anti-Leptospira spp. antibodies found in the present study demonstrated that this bacterium occurs in ovines of Uberlândia municipality, MG, Brazil . The need for the adoption of efficient management for the control of rodents and infection in ovines in order to avoid leptospirosis in the local flocks and future transmission to humans.

Cinética da resposta imune humoral de cães jovens imunizados contra Leptospira interrogans / Kinetics of the humoral immune response of dogs young immunized with Leptospira interrogans

Objetivou-se analisar a resposta imune humoral contra Leptospira interrogans mediante a utilização da prova de soroaglutinação microscópica (SAM) em 26 cães jovens, sendo 17 de raça definida (Grupo A) e nove sem raça (Grupo B), de ambos os sexos, pertencentes a canis e ambientes domiciliares em Uberlândia, Minas Gerais. Os cães foram vacinados com bacterina inativada comercial polivalente com os sorovares Canicola, Grippotyphosa, Icterohaemorrhagiae e Pomona. O esquema vacinal baseou-se em três imunizações. A primovacinação foi realizada aos quarenta e cinco dias de idade, considerado dia zero, e após dois reforços com intervalos de trinta dias cada. Sete colheitas sanguíneas de cada cão foram efetuadas do dia zero até aos 180 dias pós-vacinais, com intervalos de trinta dias cada. Não foram detectados títulos pré-vacinais para os sorovares Canicola, Icterohaemorrhagiae e Grippotyphosa no dia zero. Apenas um cão do grupo A foi reagente com título 1:100 contra o sorovar Pomona na primeira colheita. Não houve diferença estatística entre os títulos de anticorpos aglutinantes entre os Grupos A e B (p>0,05), induzidos pela bacterina comercial utilizada, exceto na colheita II (p<0,05), na qual o grupo B apresentou títulos para o sorovar Autumnalis em todos os cães avaliados, enquanto que, no grupo A, 64,7 por cento dos cães não foram reagentes a nenhum sorovar testado. No dia 30, títulos para o sorovar Autumnalis que persistiram até os 180 dias pós-vacinais, em ambos os grupos, variando apenas a intensidade da resposta imunológica sem diferença estatística significativa. Para avaliação da eficiência vacinal da bacterina anti-Leptospira, a presente pesquisa alerta para os ricos à infecção que os cães vacinados anualmente estão submetidos.

The objective was to analyze the humoral immune response against Leptospira interrogans using the microscopic agglutination test (MAT) in 26 young dogs, and 17 mixed breed (Group A) and nine mixed breed (Group B) of both sexes, pertaining to kennels and home environments in Uberlandia, Minas Gerais. Dogs were vaccinated with commercial inactivated polyvalent bacterin with Canicola, Grippotyphosa, Icterohaemorrhagiae and Pomona serovars. The immunization schedule was based on three immunizations. The first vaccination was performed at forty-five days of age, considered day zero, and after two boosters at intervals of thirty days each. Seven blood samples from each dog were made from time zero up to 180 days post-vaccination, at intervals of thirty days each. Titles have not been detected pre-vaccination against serovars Canicola, and Icterohaemorrhagiae Grippotyphosa on day zero. Only one dog in group A was reactive with a titer of 1:100 against Pomona in the first harvest. There was no statistical difference between the agglutinating titers between Groups A and B (p>0.05) induced by commercial vaccine used, except at harvest II (p<0.05), in which the group B presented evidence to serovar Autumnalis in all dogs evaluated, whereas in group A, 64.7 percent of dogs were not reactive to any serovar tested. There were on the 30th title to serovar Autumnalis that persisted until 180 days post-vaccination in both groups, varying only the intensity of immune response without significant statistical difference. To assess the efficiency of vaccine culture anti-Leptospira this research to warn the risks infection that dogs are vaccinated annually submitted.